2 结果
在细胞培养孔中加入毒素后24h就可以观察到细胞的病变，用倒置显微镜观察，开始时有部分细胞圆缩，然后可见整片的细胞呈网状，继而细胞发生崩解。
用连续稀释毒素，四甲基偶氮唑盐比色法测得CD５０为1pg。
3 讨论
活细胞在生长和增殖过程中，线粒体内的脱氢酶可以将黄色的四甲基偶氮唑盐分解成蓝紫色的Fonnazan，生成的Fonnazan量的多少与细胞的数量和细胞的活性成正比。但是，Fonnazan不溶于水，溶于有机剂［１０，１１］。本实验室在细胞加入四甲基偶氮唑盐，经培养产生Fonnazan后采用二甲基亚枫裂解细胞，并将沉淀在细胞内的不溶性Fonnazan溶解，然后才能测定其OD值。
本实验根据活细胞的这一特征，建立了测定vero毒素-1 CD５０的四甲基偶氮唑盐法，该方法与传统的３Ｈ-Tdr掺入法相比有许多的优点，如方法简便、避免使用同位素以及结果容易读取等；与肉眼目测法相比，该方法重复性好，不受实验者工作经验等主观因素的影响。本方法同样适用于其他毒素细胞毒性的测定，值得推广。
【参考文献】
1 O’Brien AD，Laveck GD，Thompson MR and Formal SB.Producing of Shgella dysentriae type 1-like cytotoxin by Escherichia coli.J Infect Dis，1982，146(6)：763-769.
2 扬平，扬会利，林怡芳.Ｏ１５７∶H7感染症的流行概况.国外医学·卫生学分册，1997，24(3)：170-173.
3 Marques LRM，Moore MA，Wells JG，et al.Producing of Shiga-like toxin by Escherichia coli.J Infect Dis，1986，154(2):238-341.
4 O’Brien AD and Laveck GD. Purification and characteri-zation of a Shigella dysenteriae 1-like toxin produced by Escherichia coli.Infect Immun，1983，40:675-683.
5 Noda M，Yutsudo T，Nakaauashi N，et al.Purification and some properties of Shiga-like toxin from Escherichia coli O１５７∶H7 that is immunologically identical to Shiga toxin.Microb Pathogg，1987，2:339-349.
6 O’Brien AD，Holmec RK.Shiga and Shiga-like toxins.M-icrob Rev，1987，51:206-220.
7 余传霖.肠出血性大肠埃希氏菌产生的Vero毒素.国外医学·微生物学分册，1994，17(3)：124-125.
8 Price P，Mcmillan TJ.Use of the terazolium assay in measuring the response of human cells to ionizing radiation.Cancer Res，1990，50:1392-1395.
9 Denizer F，R Lang.Rapid colorimetric assay for cell growth and survival : Application to proliferation and crytotoxicity assays.J Immunol Methods，1983，65(1):55-63.
10 Denizat F，R Lang.Rapid colorimetric assay for cell growth and suivival : Modifications to tetrazoliym dye procedure giving improved sensitivity and reliability.J Immunol Methods，1986，89(2):271-277.
11 Park JG，BS Kramer，SM Steinberg，et al.Chemosensitivity of human colorected carcinoma cell lines using a tetrazolium-based colorimetric assay.Cancer Res，1987，47(22):5875-5879.
【关键词】 Vero毒素-1；四甲基偶氮唑盐；CD５０
An MTT colorimetric assay for measurement of the CD５０ to vero cells of Vero toxin-1
【Abstract】 Objective To determine the CD５０ to Vero cells of Vero toxin-1.Methods MTT colorimetric assay was used.