2.4 方法精密度 取含单硝酸异山梨酯高、中、低3种浓度的样品，于同日内连续测定5次，精密度分别为1.5%、2.06%、3.10%；4日内重复测定5次，精密度分别为3.61%、3.98%、4.27%。
2.5 方法回收率 取空白血浆3份，配成含单硝酸异山梨酯高、中、低3种浓度的样品，每个浓度样品分成5份按前述样品测定法测定，计算方法回收率分别为97.0%、98.1%、102.1%。
图1 色谱图 略
3 讨论
3.1 检测波长选择 单硝酸异山梨酯无明显紫外吸收峰，仅在近紫外区有吸收（见图2），为提高检测灵敏度，检测波长应越短越好，但由于流动相在近紫外区吸收明显增高，综合二者因素，本文采用220 nm测定既不使流动相本底吸收太高（本底吸收值0.50），又能达到测定血浆中单硝酸异山梨酯灵敏度要求。
图2 单硝酸异山梨酯紫外吸收曲线 略
3.2 萃取条件选择 按赵弈等报道［3］，在pH 7.0缓冲液存在下用乙酸乙酯提取，紫外检测杂质峰较多。本文用乙醚提取，回收率与乙酸乙酯相当，但杂质峰较少，且在碱性条件下提取比中性条件下杂质峰更少。
本文建立的测定血浆中单硝酸异山梨酯的反相高效液相色谱法具有操作简便、灵敏、准确等特点，能满足药代动力学和生物利用度研究的需要，已用于复方单硝酸异山梨酯缓释片的生物利用度和药代动力学的测定以及治疗药物监测（待发表），结果准确可靠，为单硝酸异山梨酯人血浆中浓度测定提供了一种新的选择。
［参考文献］
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6 张晓东.高效液相色谱法测定5-单硝酸异山梨醇酯片含量.中国药科大学学报，1993，24（4）:229.